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Euriso-top体内蛋白质表达
富含同位素的蛋白质通常是通过在同位素培养基中培养的基因工程大肠杆菌BL21（DE3）细胞中过表达而产生的。当细胞达到生长的对数中期时，开始蛋白质诱导，通常在几个小时后停止。裂解细胞并收集和纯化蛋白质。同位素生长培养基通常包含13 C 6葡萄糖或13 CD 7葡萄糖作为唯一碳源，以及富含15 N的氯化铵作为唯一氮源。通过使用含有氨基酸的培养基可以提高蛋白质产量。
选择性氨基酸类型的标记通常可以通过在诱导之前将标记的氨基酸直接添加到培养基中来实现。当细菌系统不能以适当折叠的形式产生靶蛋白时，通常依赖于真核表达系统。用于标记蛋白质的最常见的真核表达系统是使用昆虫幼虫细胞的杆状病毒表达载体系统（BEVS）。酵母和哺乳动物细胞也用于蛋白质表达。对于昆虫和哺乳动物培养基，可以进行选择性和统一的标记。
无论表达系统如何，大于约30 KDa的蛋白质通常都需要氘化以简化光谱并减少与1H双极偶联相关的谱线扩展。