ArcicZymes从RNA制备物中去除基因组DNA
RNA的检测和定量通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和定量RT-PCR(RT-qPCR)进行。这些方法广泛用于分子研究和临床诊断,但不能区分cDNA扩增和基因组DNA。这可能会导致产生假阳性结果,并且在RT-qPCR的情况下,可能会错误估计RNA量。
RT-qPCR可能会导致基因组DNA污染的几种来源,最常见的来源之一是RNA提取所用的细胞。通常,PCR是使用跨内含子的引物设计的,目的是特异性扩增cDNA。但是,智能引物设计不能保证准确的RNA定量。除非内含子的大小足够大,否则污染的gDNA仍可能竞争引物和探针并导致假阳性。加工过的假基因也可能构成假阳性的重要来源。这些假基因不含内含子,与cDNA相同。因此,在RT-PCR和RT-qPCR中,在扩增前去除任何污染性DNA是谨慎的。
从RNA去除污染的基因组DNA的最常见方法是DNase I处理。现在可以使用一种新的快速方法– Heat&Run gDNA去除试剂盒在此处。