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关于凝集素

蚕豆凝集素是一种弱的非特异性血凝素，它具有扁豆 (LcH) 和豌豆 (PSA) 凝集素的一些碳水化合物结合特性。VFA 可被甘露糖、葡萄糖和 GlcNAc 抑制，以及其他几种糖类。岩藻糖残基与天冬酰胺连接的 GlcNAc 连接的 α(1,6) 增强了结合 1。这种特异性与 LcH 和 PSA 的特异性相当。VFA 被比 LcH 更低浓度的甘露糖抑制、PSA 或 Con A。虽然 LcH 和 PSA 与葡萄糖和甘露糖的反应同样好，但通过凝集抑制试验确定，葡萄糖对 VFA 的抑制作用仅为甘露糖的 25%。这类似于 Con A 的反应性，Con A 对葡萄糖的亲和力也低于甘露糖。对 VFA、LcH、PSA 和 Con A 进行了比较结合研究。凝集抑制测定表明 VFA 类似于 LcH 和 PSA。然而，VFA 并没有表现出与几种汽车相同的反应性增加水合物衍生物，相对于甘露糖，如 LcH 和 PSA 2。所有四种甘露糖特异性凝集素都与 6C3HED 小鼠腹水肿瘤细胞 3 的细胞表面结合。这种结合可以被甲基 αD-甘露糖抑制。已经进行了比较以确定每种凝集素在肿瘤细胞上竞争受体位点的有效性。这种比较的结果表明 VFA 不如两者一样有效LcH 或 PSA，但至少是 Con A 的两倍。蚕豆的粗提物和纯化的凝集素对人和鼠类淋巴细胞具有促有丝分裂作用 4,5。[3H] 胸苷的掺入对于 VFA 而言略低与其他凝集素相比，但对 VFA 的反应似乎对所用凝集素的量不那么敏感 5。VFA 是由两个不同亚基组成的四聚体。亚基的大小与发现的 α 和 β 亚基相当在 LcH 和 PSA 中。此外，VFA 的聚合分子量与LcH 和 PSA，但不到 Con A 的一半。VFA、LcH 和 PSA 的结构相似性与它们的碳水化合物结合特性一致。Con A 在结构上不同于这三种凝集素，并且与含有甘露糖的糖缀合物的反应不同。与 LcH 和 PSA 不同，VFA 受 pH 和离子条件的影响。冻干制剂在 pH 5-10 之间形成不溶性聚集体。在中性 pH 条件下，冻干凝集素在 1.0 M NaCl 中的溶解度高于在较低或较高盐浓度中的溶解度。储存时在 pH 5 时，凝集素不形成聚集体 5。VFA 是一种含有甘露糖和 GlcNAc 的糖蛋白。凝集素与这些碳水化合物的反应性可能有助于解释纯化制剂中聚集体的形成。聚集体可以溶解在 10% 的蔗糖中。VFA已通过圆二色性测量显示含有高达 23% 的 α-螺旋结构6，这与大多数其他凝集素不同。有趣的是，GlcNAc 或甲基-α 的结合;-甘露糖苷将其结构几乎完全改变为 β 折叠，某些阿拉伯半乳聚糖或半乳甘露聚糖（例如瓜尔胶）也是如此。树胶还可以将 VFA 的红细胞凝集活性提高 16 至 32 倍 7。VFA 的 X 射线晶体结构与结合葡萄糖已解析为 2.8 Å；它显示广泛的 β 结构，与刀豆球蛋白 A 结构非常相似 8 。 VFA 的所有制剂都含有两个亚基 9 的各种片段和聚合物。这解释了通过 SDS-PAGE 分析时 VFA 的异质性。

参考文献

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