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ECM BIOSCIENCES的A431细胞裂解液
A431细胞在细胞表面表达约106种表皮生长因子（EGF）受体。在用EGF刺激后，A431细胞的EGF受体磷酸化水平显着增加，随后激活了主要的细胞信号传导途径，例如PKB / Akt和MAP激酶途径。在EGF刺激后的不同时间点，这些细胞信号通路的下游，各种细胞骨架，细胞质和核蛋白被磷酸化。
在含有10％胎牛血清的DMEM中生长的A431细胞的融合培养物在1％SDS，1.0 mM原钒酸钠，10 mM Tris（pH 7.4）缓冲液中裂解。在稀释至最终浓度和缓冲液之前，使用BCA方法（Pierce）确定蛋白质浓度。