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融合蛋白的免疫筛选实验-资讯wiki版

基本方案 IPTG法 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒 LB 顶层琼脂糖 叠氮钠 第一抗体 仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜 实验步骤 1. 在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ......阅读全文 Yeast基因文库的分类和选择

文库种类Dharmacon酵母资源包括多个酵母基因组文库,包括ORF文库、基因敲除(Knock Out)菌株、蛋白质相互作用文库、突变菌株和各种筛选文库等。除此之外,Dharmacon 针对Saccharomyces cerevisiae 研究领域提供了Zoonome siRNA 文库。酵母

武汉病毒所在寨卡病毒免疫原设计方面取得进展

寨卡病毒(ZIKV)等黄病毒科病毒在全球广泛流行,引起较大危害,而目前尚无批准的特效药物和疫苗用于防治。ZIKV的囊膜蛋白(E蛋白)在病毒感染过程中发挥着重要作用,是一个理想的抗病毒靶标。在天然病毒粒子上,E蛋白以反向平行二聚体的形式存在。已有研究表明,靶向E蛋白天然二聚体空间构象的抗体具有相对

Yeast基因文库的分类和选择

自1995 年成立以来,Dharmacon 提供各种用于批量研究基因功能的工具,支持最多从全基因组范围到信号通路、基因家族方面研究基因与疾病、表型、分子机理对应的关系。近年来随着高端酶标仪、高通量显微镜、自动化流式细胞仪、高内涵等设备的普及和技术更新,Dharmacon 文库在各个领域中

单抗制备、血细胞纯化、细胞器分离的离心条件选择

通用离心机在各行业应用得非常广泛。目前在科研单位应用比较多的离心机产品有高速离心机、血液离心机、细胞离心机等,种类繁多,功能也不尽相同。不同试验需要不同的离心条件,经常需要对细胞悬液离心,以增加细胞浓度或洗除有关试剂,可调节的台式离心机就能满足大多试验的需求,那么本文简单介绍一下在单抗制备、血细胞纯

单克隆抗体的制备实验

单克隆抗体的制备实验可以用于:(1)将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞杂交, 获得既能产生抗体, 又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体;(2)该技术是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。实验方法原理单克隆抗体技术(monoclo

酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用

摘要 蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域,它的主要任务是识别鉴定细胞、组织或机体的全部蛋白质,并分析蛋白质的功能及其模式。 因此,揭示蛋白质组中蛋白质间的相互作用关系也是蛋白质组学的重要内容之一。 酵母双杂交技术是用来检测蛋白质间是否相互作用的一

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术

实验方法原理1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。制备单

活体生物发光成像技术的最新进展

活体动物体内光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术

实验方法原理 1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤

亲和层析实验:常规方法

实验步骤一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。

一、亲和介质的选择 亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过 抗体筛选技术汇总

近年来,生物药的市场需求逐年扩容,其中抗体药物因其靶向性好,治疗效果显著,在生物药中占据着举足轻重的地位,目前已经进入了抗体药物发展的黄金时代。随着抗体药的需求越来越大,抗体筛选技术的发展也是日新月异,目前应用较普遍的有杂交瘤技术、抗体文库筛选技术、纳米抗体技术和转基因小鼠抗体筛选技术。其中抗体

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术

1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫

筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(二)

方法λ噬菌体的平板培养1. 取适当大肠杆菌菌株的单克隆进行接种,按第 2 章方案 1 介绍的方法制备用于铺平板的培养细菌。2. 假定每个 90 mm 平皿和 150 mm 平皿分别可长出 2X104 个和 5X104 个噬菌斑,计算筛选文库所需平皿数。对应每个平皿准备一个无菌试管(13 mm

与时间赛跑!国内外企业/机构新冠病毒疫苗研发纪实

过去5年间,全世界经历了多次病毒疫情的突然爆发,包括非洲埃博拉病毒疫情,美洲寨卡病毒疫情,中东呼吸综合征疫情和此次新型冠状病毒疫情。 与过历次疫情不同的是,借助先进的技术手段,此次疫情中我国研究团队得以快速分离出病毒并获得了新型冠状病毒的基因序列信息。1月12日,世界卫生组织宣布已收到中国分享

单链丝状噬菌体展示系统

一、单链丝状噬茁体展示系统1、pIII展示系统及噬苗体抗体丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位点可供外源序列插入,即N端和近N端可伸屈

单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体...

单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体展示系统一、单链丝状噬茁体展示系统1、pIII展示系统及噬苗体抗体丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋

基于增强野生型MLL蛋白稳定性的儿童白血病新疗法

Taspase1是一种特殊的肽链内切酶【1】, 在哺乳动物中已知的底物仅包括MLL,MLL2,TFIIA, 并且具有自身内切酶的活性。其中MLL组蛋白甲基转移酶在人类白血病中研究最为广泛,因为MLL的断裂融合会引发混合谱系白血病,包括急性髓性和淋巴性白血病。已有的报道显示,80%的儿童白血病为这

11篇!Science最新研究成果概览

1.Science:N-豆蔻酰化蛋白质量控制机制 doi:10.1126/science.aaw4912 人们早就知道蛋白的稳定性受其N-末端氨基酸残基的影响,并且在过去三十年中大量的研究工作已描述了一系列N-端规则(N-end rule)途径,这些途径通过N-末端的蛋白降解子基序让其所在的

年度巨献:2019癌症免疫疗法重磅级研究成果!

时光总是匆匆易逝,转眼间,2019年就要结束了,在即将过去的一年里,科学家们在癌症免疫疗法研究领域取得了哪些重要的研究成果呢?本文中,小编对相关重要的研究成果进行整理,分享给大家! 图片来源:Emory University 【1】Immunity:阐明T细胞\"耗尽”的机制有望改善癌症免疫疗

噬菌体展示技术的原理及应用

将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合(插入信号肽与衣壳蛋白基因间)后,以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面,每个噬菌体只含1个外源基因,被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性,展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体,就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示

小分子抗原制备要点和注意事项-2

在Eva M.Brun等(2004)的实验中,根据待测物杀螟松的结构设计了多种半抗原的组合,具有特异性的结构的是用椭圆标记出来的,在连接偶联臂时就要充分考虑暴露这一重要的抗原表位,研究中通过对比接入偶联臂的不同结构的半抗原,显示充分暴露该结构的F7半抗原制备人工抗原免疫动物得到的多克隆抗体,具有

基因工程重组抗体技术的研究

在抗体研究的漫长过程中,相继发展了三代不同水平的抗体制备技术。其中以抗原免疫高等脊椎动物制备的多克隆抗体,称为第一代抗体;通过杂交瘤技术生产的只针对某一种特定抗原决定簇的单克隆抗体,称为第二代抗体;应用重组DNA技术或是基因突变的方法改造某种抗体基因的编码序列,使之产生出自然界中原本存在的抗体蛋白质

液体培养液中裂解感染实验

本方法适用于对可免疫检测的融合蛋白进行快速筛选λgtll 重组噬菌体。但在其他条件下(如:对感染率的优化,42°C λ噬菌体基因的失活及裂解前收集),此方法亦可用于产生制备量的融合蛋白 (Runge1992)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔

筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(一)

试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿IPTG抗原-抗体复合物检测试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液放射性碘标记第二抗体第一抗体LB 琼脂板LB 顶层琼脂板硝酸纤维素滤膜λ噬菌体表达文库E.coli仪器、耗材 预设 42°C 的空气培养箱培养管平头镊子装有防水黑墨水(印度墨水)并带有 18 号针头的注射器实验步

细胞自噬的研究方法

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chlor

细胞自噬的研究方法

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:一、自噬诱导剂 (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690,330/


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