新一代细菌内毒素检测技术---定量法鲎试验

细菌内毒素（既热原）是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分，少量的内毒素静脉注射就可以引起发烧即 热原反应 ，大剂量注射则可引起血液循环障碍和内毒素休克，严重时甚至导致死亡。因此，生物制品类、注射用药剂、化学药品类、放射性药物、抗生素类、疫苗类、透析液等制剂以及植入性医疗器材必须经过细菌内毒素检测试验合格后才能使用。鲎试验法是国际上至今为止检测内毒素最好的方法，它简单﹑快速﹑灵敏﹑准确，因而被欧美药典及我国药典定为法定内毒素检查法。该法具有灵敏度高、特异性强和操作简便快捷等特点，逐步取代家兔热原试验，成为注射用药、静脉用药、医疗器械、食品、水源细菌内毒素检测的最佳方法。鲎试验法所用的试剂为从海洋动物鲎的变形细胞溶解物提取的鲎试剂。目前国内市场上的鲎试剂大多为凝胶法鲎试剂。凝胶法鲎试剂是根据鲎血变形细胞裂解物和细菌内毒素反应，形成凝胶来目测判断是否有细菌内毒素存在，此方法无法准确定量。只能得出大于或等于内毒素限值或者小于内毒素限值的定性结果。近年来鲎试验法的应用范围不断开拓，多种原因导致了凝胶法鲎试剂已经不能满足鲎试验法发展的需求：一、制药工业生产工艺流程的细菌内毒素水平动态监控必须要采用定量法鲎试剂。目前凝胶法鲎试剂大多用于制药工业成品出厂前的内毒素限量试验。如果发现内毒素含量等于或者大于内毒素限值，该批产品不合格，必须销毁。不合格品的出现将会对制药企业产生重大经济损失。而采用定量法鲎试剂对生产工艺流程进行内毒素水平的动态监控，在内毒素水平升高，但还未达到或超过内毒素限值时及时发现问题，可以避免企业的经济损失。制药行业实行新版GMP的要求：（1）药品生产过程的质量控制为质量控制中的事前控制。（2）对生产过程进行动态控制。（3）要求取样方便、微量、操作简单、快速、检查准确可靠并能自动处理数据。定量法鲎试剂灵敏度高，操作自动化，可以准确定量，最适于监控内毒素含量的变化趋势，可以有效控制各环节操作，及时反馈信息给相关操作部门，能更直观和更好地控制内毒素，可以大大减少不必要的损失。二、在临床医学上，病人体液中的细菌内毒素水平定量检测具有重大意义。病人体液的细菌内毒素含量直接体现了革兰氏阴性菌感染的程度。体液内毒素水平检测可以用于快速诊断革兰氏阴性菌感染引起的脓毒症及内毒素血症。由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症目前仍是临床上的主要死亡原因之一。作为临床早期诊断革兰氏阴性菌感染的细菌学培养需要几天时间，不仅耗时长，而且培养阳性率很低。厦门市鲎试剂实验厂有限公司内毒素检测鲎试剂盒（动态浊度法）采用独特配方样本处理液，有效排除了血浆中各种干扰因素对鲎试验的干扰，在2小时之内准确检测血浆细菌内毒素含量，是革兰氏阴性菌感染早期诊断的最佳方法之一。三、根据鲎试剂中的G因子旁路反应而设计的真菌（1,3）- -D-葡聚糖定量检测鲎试验是早期快速诊断深部真菌感染的好方法。近年来随着广谱抗生素、激素和免疫抑制剂以及各种导管插管等治疗手段的广泛应用，深部真菌感染的发病率日渐增高。免疫功能低下患者，如 HIV感染者，糖尿病患者，外科大手术术后患者等，也易发生深部真菌感染。目前，深部真菌感染已成为免疫功能低下患者发病和死亡最常见的原因。诊断真菌病需要进行真菌培养，耗时长,培养阳性率很低。厦门市鲎试剂实验厂有限公司生产出真菌葡聚糖检测试剂盒（动态浊度法）可以在2小时内定量检测人血浆中的（1,3）- -D-葡聚糖。为早期快速诊断深部真菌感染诊断提供准确依据。定量法鲎试验在药典上称为光度测定法。分为浊度法和显色基质法。浊度法鲎试剂是利用光学检测系统读取在形成凝胶的过程中反应液浑浊度升高的快慢和内毒素浓度成反比例的关系由软件转换成内毒素的浓度。而显色基质法是在反应液中添加人工合成的显色基质，根据反应液中内毒素浓度和在孵育终止时释放出的显色基团的量之间成正比，定量检测样品中的内毒素浓度。无论是动态浊度法和显色法鲎试验均需要带良好温育系统的动态光度测定仪器及配套专业的内毒素和真菌葡聚糖检测软件。lonza品牌的内毒素是美国原装进口鲎试验微生物检测系统是专门为细菌内毒素及真菌葡聚糖定量检测鲎试验设计的微生物检测系统。 配套lonza品牌下WinKQCL内毒素检测与分析软件 、LONZA内毒素检测仪和其他辅助仪器及除热原耗材，适用于所有的定量法鲎实验，是内毒素检测首选推荐机型。具有如下特点：产品简介：1、WinKQCL内毒素检测与分析软件为内毒素定量检测、数据管理和出具报告提供了完整的解决方案。可以作为单机系统安装，也可以与世界各地的多个实验室的多台仪器建立接口，在同一个数据库里存储数据。技术参数：能与以下仪器兼容：1）吸收光酶标仪 Molecular Devices SpectraMax : 340PC, 340PC384, Plus384 and 190PC Molecular Devices VersaMax BioTek Eon (5.1 and higher)、ELx808 2）荧光分析仪 Molecular Devices Gemini EM, Gemini XPS and Gemini XS BioTek FLx800 3）多功能酶标仪 BioTek Synergy 2 Molecular Devices SpectraMax : M2, M2e, M3, M4, M5 and M5e Molecular Devices FlexStation Tecan Sunrise reader 来自统一工作站的多个用户可同时控制该软件，在多于一台电脑上安装时，其它电脑需要购买license 可得到定制化的内毒素检测报告 满足21 CFR Part 11对电子版记录和签名、审计跟踪及数据存储的技术要求 支持安装、用户界面、报告、用户帮助和手册多语言：英语、法语、德语、意大利语、日语、西班牙语、葡萄牙语、简体中文和繁体中文产品应用：配套内毒素检测仪使用，系统可支持用于检测革兰氏阴性细菌内毒素，适于水样、大体积注射用药物、医学装备、小体积注射用药物、疫苗、抗体和生物样本的内毒素检测。动态法检测内毒素时，安装在可孵育动态酶标仪上的动态软件，可以根据反应时间来推算出内毒素含量。订购信息：产品简介：ELx808 光吸收酶标仪在数据处理和分析方面具有出色的灵活性。这款多通道酶标仪延续了BioTek提供最高规格酶标仪的一贯传统，具有精度高、准确性好、重复性强的特点。通过ELx808机载的自检诊断及校准测试板，可以很容易地确认并记录酶标仪的性能。所有计算都可自动完成。凭借在高质量硬件制造方面的优良传统，ELx808为酶标仪领域设定了全新标杆。技术参数：支持孔板类型：96孔板光源：卤钨灯（Tungsten halogen bulb）动态检测范围：0 to 4.0 OD波长范围：380 to 900 nm；340-900nm（紫外模式）波长选择：干涉滤光片准确度： 1% 0.01 OD from 0 to 2.5 OD； 2% 0.01 OD from 2.5 to 3.5 OD线性： 1% from 0 to 2.5 OD； 2% from 2.5 to 3.5 OD重复性： 0.5% 0.005 OD from 0 to 2.5 OD； 1.5% 0.005 OD from 2.5 to 3.5 OD； 2.5% 0.005 OD from 3.5 to 4.0 OD读值方法：终点法，动态法，线性扫描读值速度：单波长12秒，双波长20秒，动态单波长5秒机载软件：55个用户可编制程序电源：100-240 V @ 50/60 Hz滤光片包括：405、450、490、630nm；紫外模式另配340nm光学探针信息：束状光纤光探测器：8个二极管，1个reference温度控制：从高于室温4℃到50℃（选项I），孔间一致性为 0.5℃震荡功能：速度和时间用户可调诊断功能：机载的自检诊断及校准测试板重量：13.6 kg尺寸：16 D x 15.5 W x 8.75 H in.（40.6 x 39.4 x 22.2 cm）法规：CE Mark, ETL Mark for UL3101-1、CAN/CSA C22.2 No. 1010.1、Conforms to IEC 1010-1显示：2 x 24 character LCD产品应用：ELx808LBS孵育酶标仪可以用于动态显色法LAL检测、动态浊度法LAL检测及端点显色法LAL检测，具有405、450、490、630和340 nm滤光片。订购信息：